Riwaya Coronavirus (SARS-CoV-2) Kitengo cha wakati halisi cha PCR
Kitengo hiki cha PCR nyeti sana, tayari kinapatikana katika muundo wa lyophilized (mchakato wa kukausha-kukausha) kwa uhifadhi wa muda mrefu. Kiti kinaweza kusafirishwa na kuhifadhiwa kwa joto la kawaida na ni thabiti kwa mwaka mmoja. Kila bomba la Premix lina vitu vyote vya reagents vinavyohitajika kwa ukuzaji wa PCR, pamoja na reverse-transcriptase, polymerase ya TAQ, primers, probes, na sehemu ndogo za DNTPS. Inahitaji tu kuongeza maji 13 ya maji na template ya RNA iliyotolewa, basi inaweza kuendeshwa na kupandishwa kwenye vyombo vya PCR.
Mashine ya qPCR inapaswa kukidhi mahitaji yafuatayo:
1. Fit 8 strip PCR tube kiasi 0.2 ml
2. Kuwa na njia zaidi ya nne za kugundua:
| Kituo | Udadisi (NM) | Uzalishaji (NM) | Dyes zilizowekwa mapema |
| 1. | 470 | 525 | Fam, Sybr Green i |
| 2 | 523 | 564 | Vic, Hex, Tet, Joe |
| 3. | 571 | 621 | Rox, Texas-nyekundu |
| 4 | 630 | 670 | Cy5 |
PCR-Platforms:
Mfumo wa PCR wa 7500Real, BioRad CF96, Mfumo wa kugundua wa wakati halisi wa PCR, Stratagene MX3000P, MX3005P
Ugumu wa usafirishaji baridi wa mnyororo wa riwaya ya coronavirus nucleic acid reagent
Wakati reagents za kawaida za kugundua asidi ya kiini husafirishwa kwa umbali mrefu, (-20 ± 5) ℃ uhifadhi wa mnyororo wa baridi na usafirishaji inahitajika ili kuhakikisha kuwa bioactive ya enzyme katika reagents inabaki kuwa hai. Ili kuhakikisha kuwa hali ya joto hufikia kiwango, kilo kadhaa za barafu kavu zinahitajika kwa kila sanduku la upimaji wa asidi ya kiini hata chini ya 50g, lakini inaweza kudumu kwa siku mbili au tatu. Kwa mtazamo wa mazoezi ya tasnia, uzito halisi wa vitendaji vilivyotolewa na wazalishaji ni chini ya 10% (au chini ya thamani hii) ya chombo. Uzito mwingi hutoka kwa barafu kavu, pakiti za barafu na sanduku za povu, kwa hivyo gharama ya usafirishaji ni kubwa sana.
Mnamo Machi 2020, COVID-19 ilianza kuzuka kwa kiwango kikubwa nje ya nchi, na mahitaji ya riwaya ya kugundua asidi ya nuksi ya coronavirus iliongezeka sana. Licha ya gharama kubwa ya kusafirisha viboreshaji kwenye mnyororo wa baridi, wazalishaji wengi bado wanaweza kuikubali kwa sababu ya idadi kubwa na faida kubwa.
Walakini, pamoja na uboreshaji wa sera za kitaifa za usafirishaji wa bidhaa za kupambana na ugonjwa, na vile vile uboreshaji wa udhibiti wa kitaifa juu ya mtiririko wa watu na vifaa, kuna ugani na kutokuwa na uhakika katika wakati wa usafirishaji wa reagents, ambayo ilisababisha shida maarufu za bidhaa zilizosababishwa na usafirishaji. Wakati wa usafirishaji ulioongezwa (wakati wa usafirishaji wa karibu nusu ya mwezi ni kawaida sana) husababisha kushindwa kwa bidhaa mara kwa mara wakati bidhaa inafikia mteja. Hii imesumbua biashara nyingi za nje za asidi.
Teknolojia ya lyophilized ya reagent ya PCR ilisaidia usafirishaji wa riwaya ya coronavirus nucleic acid reagent ulimwenguni kote
Vipimo vya Lyophilized PCR vinaweza kusafirishwa na kuhifadhiwa kwa joto la kawaida, ambayo haiwezi kupunguza tu gharama ya usafirishaji, lakini pia epuka shida za ubora zinazosababishwa na mchakato wa usafirishaji. Kwa hivyo, lyophilizing reagent ndio njia bora ya kutatua shida ya usafirishaji wa usafirishaji.
Lyophilization inajumuisha kufungia suluhisho katika hali thabiti, na kisha kupungua na kutenganisha mvuke wa maji chini ya hali ya utupu. Solute kavu inabaki kwenye chombo na muundo na shughuli sawa. Ikilinganishwa na reagents za kawaida za kioevu, riwaya kamili ya riwaya ya lyophilized coronavirus nucleic acid reagent inayozalishwa na bio ina sifa zifuatazo:
Utulivu mkubwa wa joto:Inaweza na matibabu ya kusimama kwa 56 ℃ kwa siku 60, na morphology na utendaji wa reagent kubaki bila kubadilika.
Hifadhi ya kawaida ya joto na usafirishaji:Hakuna haja ya mnyororo wa baridi, hakuna haja ya kuhifadhi kwa joto la chini kabla ya kufunguliwa, toa kikamilifu nafasi ya kuhifadhi baridi.
Tayari kutumia:Kuongeza vifaa vyote, hakuna haja ya usanidi wa mfumo, kuzuia upotezaji wa vifaa na mnato wa juu kama vile enzyme.
Malengo ya kuzidisha kwenye bomba moja:Lengo la kugundua linashughulikia gene ya riwaya ya coronavirus orf1ab, jeni, geni ili kuzuia genovariation ya virusi. Ili kupunguza hasi ya uwongo, gene ya RNase P hutumiwa kama udhibiti wa ndani, ili kukidhi hitaji la kliniki la udhibiti wa ubora wa mfano.
